%0 Journal Article 
%A Ayala Suárez, Rubén A.
%T Diseño de cebadores degenerados para la amplificación del gen de la prolactina en peces perciformes
%D 2015
%U http://hdl.handle.net/10498/17723
%X Los perciformes conforman uno de los órdenes de peces que reportan más beneficios en la acuicultura mundial, dado su elevado nivel de producción y demanda. En España y concretamente en Andalucía, se produce atún, corvina, dorada, lubina y seriola entre otras especies de perciformes. El cultivo de estas especies se lleva a cabo generalmente en el mar o en zonas intermareales, donde el cambio de la salinidad constituye un factor a considerar en el crecimiento de los peces. El sistema endocrino juega un papel importante en la osmorregulación mediante diferentes hormonas, como la hormona del crecimiento, el cortisol o la prolactina. La caracterización y seguimiento de las hormonas que participan en la regulación de este sistema es por tanto de interés en las especies producidas, para valorar su capacidad de respuesta y actuar en consecuencia, alcanzando las condiciones óptimas de cultivo. En el presente trabajo se lleva a cabo el desarrollo de unos oligos degenerados para la identificación y amplificación de la hormona prolactina en perciformes. 
Un oligo (cebador o primer) es una secuencia corta de nucleótidos que hibrida gracias a su secuencia con una zona específica del ADN objetivo, de forma que es posible mediante el uso de otro oligo de sentido contrario, amplificar una zona delimitada del ADN mediante una reacción de amplificación en cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en inglés). Para la realización del trabajo, se seleccionaron secuencias codificadoras de prolactina de varios perciformes del banco de datos del NCBI y se alinearon mediante la herramienta ClustalW2. Las zonas con mayor grado de conservación se utilizaron para el diseño de los cebadores, introduciendo degeneraciones en aquellas bases que presentaban diversificación. Se realizaron diferentes PCRs para comprobar su capacidad de amplificación en distintas especies de perciformes. 
Además, para demostrar su utilidad, se clonó y secuenció la prolactina de corvina (Argyrosomus regius), así como se diseñaron cebadores específicos para PCR cuantitativa. Mediante esta técnica se realizó la cuantificación de la expresión relativa de prolactina, en distintos individuos de corvina que estaban sometidos a diversas condiciones de salinidad 5 ‰, 12‰, 38‰ y 55‰. Los resultados obtenidos demuestran que la expresión relativa de prolactina se modifica según las condiciones ambientales a las que esté sometida el individuo, mostrándose los valores más altos de expresión en la salinidad más baja y decreciendo con el aumento de salinidad.

%K Cebadores degenerados
%K Prolactina
%K Perciformes
%K Genética
%K Secuenciación
%K Expresión génica
%K Cuantificación
%K Clonaje molecular
%~ Universidad de Cádiz