Simultaneous determination by UHPLC-PDA of major capsaicinoids and capsinoids contents in peppers

Abstract

Los capsaicinoides y capsinoides han sido foco de especial atención por sus beneficios para la salud. Se ha desarrollado y validado un método eficaz y rápido de cromatografía líquida de ultra-alta resolución (UHPLC-PDA) para la separación simultánea y la determinación cuantitativa de los principales capsaicinoides y capsinoides presentes en pimientos. La separación de todos los compuestos de interés se logró en menos de 2 min mediante una columna ACQUITY UPLC BEH rp-C18 (100 mm x 2,1 mm i.d, tamaño de partícula 1,7 μm). Las variables que se han optimizado son la fase móvil (agua como disolvente A y acetonitrilo como disolvente B, ambos acidificados mediante la adición de ácido acético al 0,1%), el gradiente de separación, la temperatura de la columna (35-70 ºC), la velocidad de flujo (0,6-0,95 mL min-1) y el volumen de inyección (2,5-3,5 μL). La evaluación del rendimiento cromatográfico reveló una excelente resolución, factor de retención y selectividad. El método fue validado satisfactoriamente en términos de linealidad, límites de detección y cuantificación, precisión y robustez.

Capsaicinoids and capsinoids compounds have been a focus of special attention for their health benefits. An effective and rapid Ultra-High-Performance Liquid Chromatography (UHPLC-PDA) method has been developed and validated for the simultaneous separation and quantitative determination of the major capsaicinoids and capsinoids present in peppers. The separation of all the compounds of interest was achieved in less than 2 min by means of an ACQUITY UPLC BEH rp-C18 column (100 mm × 2.1 mm i.d., 1.7 μm particle size). The variables that have been optimized are the mobile phase (water as solvent A and acetonitrile as solvent B, both acidified by adding 0.1% acetic acid), separation gradient, column temperature (35–70 ◦C), flow rate (0.6–0.95 mL min����� 1), and injection volume (2.5–3.5 μL). The evaluation of the chromatographic performance revealed excellent resolution, retention factor, and selectivity. The method was satisfactorily validated in terms of linearity, detection and quantification limits, precision, and robustness.